无菌室的使用与管理制度

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文 件 编 号        XX-XX				无菌室的使用与管理制度				第B版
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无菌室的使用与管理制度
                                        XX-XX
一、无菌室的使用
1、无菌室应保持清洁整齐，室内仅存放必须的检验用具如酒精灯、酒精棉、打火机、镊子、接种针、接种环、玻璃铅笔等。不要放与检
测无关的物品。
2、 室内检验用具及凳桌等保持固定位置，不随便移动。
3、每周用84消毒液水溶液擦拭工作台、门、窗、桌、椅及地面，然后用有效氯浓度1000mg/L的溶液喷雾消毒空气，**后紫外灯杀菌#p#分页标题#e#
半小时。
4、定期检查室内空气无菌状况，细菌数应控制在10个以下，发现不符合要求时，应立即彻底消毒灭菌。/无菌室无菌程度的测定方法：取普通肉汤琼脂平板、改良马丁培养基平板各3个（平板直径均9厘米），置无菌室各工作位置上，开盖曝露半小时，然后倒置进行培养，测细菌总数应置37℃温箱培养48小时；测霉菌数则应置27℃
温箱培养5天。细菌`霉菌总数均不得超过10个为。
5、无菌室杀菌前，应将所有物品置于操作之部位（待检物例外），
然后打开紫外灯杀菌30分钟，时间一到，关闭紫外灯待用。
6、进入无菌室前，必须于缓冲间更换消毒过的工作服、工作帽及工
作鞋。
7、 操作应严格按照无菌操作规定进行，操作中少说话，不喧哗，
以保持环境的无菌状态。
8、 高压蒸汽灭菌:工作服、口罩、稀释液等，置高压杀菌锅内，一般采用121℃灭菌半小时,当然不同的培养基有不同的要求,应分别处理。
9、火焰灭菌： 接种针、接种环等可直接火焰灭菌。
10、高温干燥灭菌： 各种玻璃器皿、注射器、吸管等，置于燥箱中160℃灭菌2小时。
11、一 般消毒:无菌室内的凳、工作台、试管架、天平、待检物容器或包装均无法进行灭菌，必须用其他方法进行消毒处理，采用84消毒液擦拭消毒，工作人员的手也用此法进行消毒。
12、 空气的消毒： 开启紫外灯照射30―60分钟 即可。
二、无菌室的准备工作使用方法
1、 先进行无菌室空间的消毒，开启紫外灯30―60分钟。
2、 检验用的有关器材， 搬入无菌室前必须分别进行灭菌消毒。
3、 操作人员必须将手清洗消毒，穿戴好无菌工作衣、帽和鞋，才能进入无菌室。
4、 进入无菌室后再一次消毒手部，然后才进行检验操作。
三、无菌室操作过程注意事项
1、 动作要轻，不能太快，以免搅动空气增加污染；玻璃器皿也应轻取轻放，以免破损污染环境。
2、 操作应在近火焰区进行。
3、 接种环、接种针等金属器材使用前后均需灼烧，灼烧时先通过内焰，使残物烘干后再灼烧灭菌。
4、 使用吸管时，切勿用嘴直接吸、吹吸管，而必须用洗耳球操作
5、 观察平板时不好开盖，如欲沾取菌落检查时，必需靠近火焰区操作，平皿盖也不能 大开，而是上下盖适当开缝。
6、进行可疑致病菌涂片染色时，应使用夹子夹持玻片，切勿用手直接拿玻片，以免造成污染，用过的玻片也应置于消毒液中浸泡消毒，然后再洗涤。
7、 工作结束，收拾好工作台上的样品及器材，**后用消毒液擦拭工作台。
四、无菌室管理规定
1、无菌室地面、台面、其它表面每日晨擦拭1次。超净台每日晨75%酒精擦拭超净台消毒，每次使用前准备好物品，将超净台紫外灭菌30分钟后方可使用。
2、  从室外带入无菌室内的所有物品表面要用75%酒精或紫外照射预先消毒。无菌操作前75%酒精消毒手掌、手背。整个操作严格执
行无菌操作。
3、每次使用后，台内物品全部取出并用消毒液喷洒消毒用后的物品归位，垃圾带出无菌室。连续使用时间超过1小时，请预约登记。
4、 无菌室内定期消毒灭菌：喷洒有效氯浓度1000mg/L的溶液        擦洗桌面、凳子，无菌室内喷雾消毒后，紫外灭菌30分。每周一次。
5、无菌室内无菌状况定期检测：灭菌后的接种室内桌上和桌下各放一套培养基平皿，暴露15分钟，盖上，37℃培养24小时，每个平皿的菌落≤4，则认为效果良好，否则需延长照射时间或加强其它措
施。每周一次。
6、灭菌后物品放在指定位置，注明灭菌日期，高压灭菌物品可存放
7-14天，过期不能再用，需重新包装灭菌。
7、 所有准备进入无菌室工作的人员必需shou先了解细胞培养的基本要
求和操作规范，并进行必要的培训。